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变异与 FASTQ / FASTQ 质量统计

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怎么读

FASTQ 质量统计

逐位置质量图给出每个位置的均值、中位数、四分位(Q1/Q3)与 10%/90% 分位(P10/P90);Illumina 数据通常在读段末端下降,中位数长期低于 20 的区段建议修剪。

碱基组成图中各位置 A/C/G/T 应大致平行;读段开头几位的波动常见于随机引物文库。N 的比例升高通常对应测序仪某个周期或某个区块的问题。

重复度用前 N 条读段估计(默认 10 万条),「去重后保留」越低说明重复越多;转录组与扩增子数据本来就有较多重复,判断时请结合实验类型。

接头图为「到该位置为止已出现接头片段的读段比例」,末端升高说明插入片段比读长短,建议先去接头再比对;也可用「FASTQ / FASTA 转换与抽样」做修剪和过滤。

方法说明

指标定义参照常用测序质控方法(Andrews 2010, FastQC;Chen et al. 2018, Bioinformatics 34:i884, fastp);读段数、碱基数与 Q20/Q30 已与 fastp 对数一致,其余指标与独立 Python 参考实现逐项一致。

数据量

在浏览器中处理,未压缩 FASTQ 最大约 200 MB;文件较大时计算需要几十秒,请耐心等待。暂不支持直接读取 .gz 压缩文件。

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